by 何赛飞出生在浙江舟山市岱山县，家中有三个女孩，她排名第二。1967年何赛飞的父母离婚，她跟随父亲日常生活。
在他十六岁的情况下，越剧电影《红楼梦》、《碧玉簪》在乡村播映，何赛飞看完之后常回家看看给爸爸学上几个，本来做文化工作的爸爸看见她音感挺好就支持她到报名越剧团。
1982年何赛飞考上浙江岱山越剧团。1983年加入浙江省小百花越剧团。1985年何赛飞从浙江艺术学校戏曲表演专业大学毕业。
五女拜寿
1984年，主演越剧电影《五女拜寿》而获得关注。
1986年，电影导演谢铁骊运行影片《红楼梦》，共六部八集的影视拍摄历经3年，招入了越剧团、戏曲、吕剧等各个戏曲剧种的女演员，何赛飞便是其中之一。影片中她饰演妙玉，那是她踏入荧幕的开端。
1991年，参演冯小刚执导的电影《大红灯笼高高挂》，在片中饰演梅珊一角。
1994年，主演李少红执导的电影《红粉》和周韵姜文执导的电影《风月》。在《红粉》中，她饰演情楼女人小萼，演技不冷不热、适当益处，这部电影也进一步提高了她知名度。
1996年，她凭借在《敌后武工队》里的演出斩获了第19届大众电影百花奖最佳女主角奖；同一年参演电视剧《情系国脉》、《汉口往事》、《昨日留言》。
1999年，主演电视剧《情迷海上花》。
饰演赵雅馨
2000年，参演电视剧《爱是阳光》，并且在剧中饰演女一号。
饰演名姬杨九红
2001年，在郭宝昌导演电视剧《大宅门》中饰演名姬杨九红，凭着在这部电影电视剧上的表现，何赛飞得到中央电视美菱杯“观众们最喜欢的十佳女演员奖”。
2002年，主演电视剧《孝庄秘史》，在剧中饰演多尔衮最宠爱的宸妃海兰珠。
2003年，参演郭宝昌导演电影电视剧《大宅门第二部》，在剧中饰演杨九红。
饰演季文月
2004年，主演电视剧《月影风荷》，在剧中饰演季文月一角。
2005年，主演电视剧《血色残阳》。
萧太太
2007年11月，与周迅、梁朝伟协作参演李安导演的影片《色戒》，在片中饰演萧太太一角。
2007年12月，何赛飞到宁波参演滑稽戏《太太万岁》；同一年主演电视剧《江湖兄弟》，剧中何赛飞与施羽饰演一对身在江湖中流荡的另一半。
2008年，主演电视剧《祈望》和《纸醉金迷》。
2009年，主演电视剧《娘家的故事》和《侬本多情》。
2010年，主演电视剧《老马家的幸福往事》。
《新女婿时代》
《后宫》
2011年，主演电视剧《新女婿时代》和《后宫》。
《女人泪》
《唐宫燕》
2012年，参演电视剧《女人泪》和《唐宫燕》，在剧中饰演唐中宗李显的老婆韦皇后。
2013年，与佟亚丽、杨烁协作参演电视剧《刀客家族的女人》；4月，何赛飞主演的电视剧《那金花和她的女婿》在全国各地地方卫视中央八台开播。
2015年，加盟代理主演抗战题材影片《那些女人》，在片中饰演水芹娘；10月，主演的喜剧《二毛驴从军记》在横店结束。
2016年6月 ，主演电视剧《老妈的桃花运》，在剧中饰演丁香香；12月，主演情绪主题电视剧《最亲最爱的人》，在剧中饰演甄婕的生母张锦屏。
2017年1月27日，参加中央电视春节晚会，演出中国戏曲《薪火相传》（天上掉下个林妹妹）。
2018年9月28日，凭借电影《那些女人》斩获了第16届汉城电影节最佳女主角。
《甜蜜》
2021年2月18日，与海青、任重一同主演的电视剧《甜蜜》在中央电视台电视剧频道栏目开播；8月5日，得到第一届美国好莱坞国际性上海电视节金萱奖建党百年全国十佳电视剧女艺人。
《追月》
《民国大侦探》
2022年7月28日，带领主演的影片《追月》入围第12届北京国际电影节“天坛奖”主竞赛单元；8月10日，参演连续剧《民国大侦探》在爱奇艺播出。
2023年1月，参与2023百花迎春，演出梅戏《女驸马》。3月20日，友情客串的电视剧《人生之路》开播。3月23日，出演的电影《川流不“熄“》公布上映预告片，宣布将于5月26日公映。
2023怎样，《梨园琴心》是通过袁雪凝具体指导，姚利、何赛飞带领主演，刘佩琦特邀出演，张勇手、陶玉玲、赵保乐、龚洁等友情客串的微视频。